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  • 真菌染色液(六胺銀法)

    發(fā)布時間:2020-1-16      閱讀次數(shù):6996
    產(chǎn)品編碼 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 單位 有效期
    BA4244B 真菌染色液(六胺銀法) 20測試 1年


           【原理

             標(biāo)本經(jīng)高碘酸氧化后,使真菌和其他機(jī)會性生物的細(xì)胞壁內(nèi)的粘多糖暴露出醛基,醛基將六胺銀還原為黑色的金屬銀。硫代硫酸鈉對已顯色的銀鹽起固定作用,并除去未反應(yīng)的銀離子。
     
    【樣本要求】
    挑取樣本制成涂片,涂片時必須注意細(xì)心操作,涂片薄而均勻。制備的涂片應(yīng)自然干燥,若采取加熱固定,固定溫度不宜過高,以玻片背面接觸手背不燙為準(zhǔn),否則可能使標(biāo)本的形態(tài)改變影響觀察結(jié)果。
     
    【檢驗方法】
    一、工作液配制:(一份工作液約8.2ml,可染8 張片):
    使用器材(自備):一次性試管、移液器,一次性吸嘴、滴管。
    200μl 硝酸銀溶液+3ml 六次甲基四胺溶液+1 瓶硼砂溶液,混合成一份工作液。
    具體操作:于潔凈的試管內(nèi)加入200μl 硝酸銀溶液和3ml 六次甲基四胺溶液,充分混勻,然后倒進(jìn)1 瓶硼砂溶液的瓶內(nèi),充分搖勻,如肉眼見少許透明顆粒,屬正常現(xiàn)象,請勿過濾,備用。
    (請按照以上順序進(jìn)行配制,以免影響工作液的效果。若工作液在當(dāng)天用完,則放常溫儲存即可;若在當(dāng)天未能用完,則須密封避光放2℃~8℃冰箱儲存,并在一個月內(nèi)使用完)。
     
    【染色步驟】
    1、挑取樣本制成涂片,自然干燥后加熱固定;
    2、滴加高碘酸溶液氧化15min,蒸餾水稍洗;
    3、將涂片放入染色玻片盒內(nèi),并將玻片盒置于62℃水浴箱中,使玻片盒漂浮于水面上。滴加1ml 工作液于涂片上,再
    蓋上盒蓋和水浴箱蓋,染色5~10min,見標(biāo)本有黃棕色反應(yīng)時,取出。(注意:工作液不能接觸到金屬離子,請確保水浴
    箱的溫度到達(dá)62℃);
    4、用蒸餾水洗后鏡檢,如著色不夠深,再重復(fù)步驟3 繼續(xù)作用;
    5、流水沖洗;
    6、用硫代硫酸鈉溶液處理3min,流水沖洗;
    7、用亮綠染液復(fù)染30~60s,水洗,待干,油鏡觀察。
     
    【染色結(jié)果】
    真菌的菌絲及孢子呈棕黑色或黑色,結(jié)構(gòu)清晰明顯,背景為綠色。
     

    *禁忌內(nèi)容或注意事項詳見說明書


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